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裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)是從體外細(xì)胞試驗(yàn)到動(dòng)物水平體內(nèi)試驗(yàn),是基因功能研究的重要飛躍。動(dòng)物實(shí)驗(yàn),由于其更能模擬人類(lèi)的生理和病理?xiàng)l件,在科研上,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)獲得的結(jié)果,將有更強(qiáng)的說(shuō)服力。腫瘤研究中,最常規(guī)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)就是裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)。由于大部分腫瘤研究使用的是人類(lèi)細(xì)胞,所以由于異種排斥的存在,我們需要免疫缺陷型小鼠來(lái)作為移植瘤模型的載體,通過(guò)對(duì)該小鼠的注射腫瘤細(xì)胞,使其成瘤,觀察流體的生長(zhǎng)來(lái)判斷其生物學(xué)變化。
細(xì)胞接種存活率只表示接種細(xì)胞后貼壁的細(xì)胞數(shù),但貼壁后的細(xì)胞不一定每個(gè)都能增殖和形成克隆。而形成克隆的細(xì)胞必為貼壁和有增殖活力的細(xì)胞??寺⌒纬陕史从臣?xì)胞群體依賴(lài)性和增殖能力兩個(gè)重要性狀。由于細(xì)胞生物學(xué)性狀不同,細(xì)胞克隆形成率差別也很大,一般初代培養(yǎng)細(xì)胞克隆形成率弱,傳代細(xì)胞系強(qiáng);二倍體細(xì)胞克隆形成率弱,轉(zhuǎn)化細(xì)胞系強(qiáng);正常細(xì)胞克隆形成率弱,腫瘤細(xì)胞強(qiáng)。并且克隆形成率與接種密度有一定關(guān)系,做克隆形成率測(cè)定時(shí),接種細(xì)胞一定要分散成單細(xì)胞懸液,直接接種在碟皿中,持續(xù)一周,隨時(shí)檢查,到細(xì)胞形成克隆時(shí)終止培養(yǎng)。
蛋白質(zhì)組學(xué)(英語(yǔ):proteomics,又譯作蛋白質(zhì)體學(xué)),是以蛋白質(zhì)組為研究對(duì)象,研究細(xì)胞、組織或生物體蛋白質(zhì)組成及其變化規(guī)律的科學(xué)。這個(gè)概念最早是在1994年,由Marc Wikins首先提出的新名詞。
肝纖維化動(dòng)物模型四氯化碳法:180~200g Wistar或SD大鼠,皮下注射40%-50%CCl4,油溶液(0.3ml/100g),每周2次,第2周 始,隔日以20%-30%酒精lml灌胃(或作為飲料),飼以單純玉米面(混以0.5%膽固醇),共10周。
免疫熒光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用熒光素進(jìn)行標(biāo)記而獲得成功。這種以熒光物質(zhì)標(biāo)記抗體而進(jìn)行抗原定位的技術(shù)稱(chēng)為熒光抗體技術(shù)(fluorescentantibodytechnique)?!∮脽晒饪贵w示蹤或檢查相應(yīng)抗原的方法稱(chēng)熒光抗體法;用已知的熒光抗原標(biāo)記物示蹤或檢查相應(yīng)抗體的方法稱(chēng)熒光抗原法。這兩種方法總稱(chēng)免疫熒光技術(shù),因?yàn)闊晒馍夭坏芘c抗體球蛋白結(jié)合,用于檢測(cè)或定位各種抗原,也可以與其他蛋白質(zhì)結(jié)合,用于檢測(cè)或定位抗體,但是在實(shí)際工作中熒光抗原技術(shù)很少應(yīng)用,所以人們習(xí)慣稱(chēng)為熒光抗體技術(shù),或稱(chēng)為免疫熒光技術(shù)。以熒光抗體方法較常用。用免疫熒光技術(shù)顯示和檢查細(xì)胞或組織內(nèi)抗原或半抗原物質(zhì)等方法稱(chēng)為免疫熒光細(xì)胞(或組織)化學(xué)技術(shù)。
肝纖維化動(dòng)物模型構(gòu)建時(shí)免疫性肝纖維化產(chǎn)生的機(jī)理是Ⅲ型變態(tài)反應(yīng)引起,白蛋白和血清的大分子物質(zhì),作為異種抗原進(jìn)入大鼠體內(nèi)后,刺激其產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,當(dāng)抗原再次進(jìn)人機(jī)體后抗原抗體結(jié)合,形成抗原—抗體免疫復(fù)合物(IC),抗原的反復(fù)、長(zhǎng)期刺激,過(guò)量的免疫復(fù)合物來(lái)不及被清除
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